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[摘要]目的 将小鼠IRF4 基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP 质粒,得到长期稳定表达IRF4的逆转录病毒载体.方法 以含IRF4 cDNA质粒作为模板,PCR扩增所需目的片段;将该片段连接入MSCV-IRES-GFP 质粒;以磷酸钙法转染293T细胞, 收集病毒上清感染GP+E86细胞后,流式细胞术和蛋白印迹技术检测IRF4的表达.结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功连接到逆转录病毒MSCV载体上.逆转录病毒上清成功感染GP+E86细胞系.结论 成功构建了小鼠IRF4逆转录病毒表达载体,并实现了IRF4在GP+E86细胞系中的外源性表达 |
关键词: [关键词]IRF4 逆转录病毒载体 小鼠 |
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