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[摘要]目的 通过构建大肠杆菌表达系统获得重组人三叶因子2(hTFF2),并研究其对结肠癌细胞SW480的迁移活性和失巢增殖活性作用.方法 通过RT-PCR获得hTFF2的cDNA,构建重组载体pET32a-hTFF2,转化大肠杆菌BL21-32a中诱导表达TrxA- hTFF2融合蛋白.产物经镍-亲和层析分离、透析纯化和Western-blot鉴定后,用48孔趋化小室和琼脂软胶法检测重组hTFF2的细胞迁移活性和失巢增殖作用.结果 通过原核表达系统,获得高纯度的表达量达到220 mg/L的TrxA-hTFF2重组融合蛋白,重组hTFF2可促进结肠癌细胞SW480的迁移活性和在琼脂软胶中生长形成克隆.结论 大肠杆菌可表达高产量和纯度的重组hTFF2,其细胞活性提示结肠癌中TFF2的表达可能促进结肠癌细胞浸润和转移 |
关键词: [关键词]三叶因子2 结肠癌 细胞迁移 失巢增殖 |
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