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大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜厚度探索
韩宏艳1
昆明医科大学第二附属医院
摘要:
[摘要]目的 针对大鼠眼球冰冻切片难度高,各研究对眼球冰冻切片厚度差异较大的问题,探索大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜的厚度.方法 将24只SD大鼠随机分为3组,使用传统的石蜡切片行HE染色做对照,分别对不同厚度的冰冻切片做HE染色和FITC-lectin荧光染色进行观察(5 μm、6 μm、8 μm、10 μm、12 μm、15 μm,n=8). 结果 视网膜冰冻切片HE染色显示6 μm和8 μm的大鼠视网膜各层细胞可看到完整细胞,密疏适宜,胞核清楚,核膜光滑完整,神经纤维层厚度均匀;6 μm视神经冰冻切片HE染色显示视神经纤维排列密集、规则,染色均匀;免疫组化染色结果显示5 μm、6 μm和8 μm的大鼠视网膜冰冻切片FITC-lectin荧光染色后层次清晰,lectin阳性细胞呈绿色分枝状,在神经节细胞及内网状层清晰可见,亦可在外网状层看到少量绿色lectin阳性细胞,10 μm及15 μm的大鼠视网膜由于各层细胞重叠严重,无法看到绿色lectin阳性细胞.6 μm的视神经冰冻切片FITC-lectin荧光染色显示清晰可见的活化小胶质细胞,胞体变肥大,突起缩短,呈阿米巴样变化.结论 6 μm的视神经冰冻切片以及6~8 μm的视网膜冰冻切片,可以得到重复性切片,也可以达到理想的免疫组化染色效果.
关键词:  [关键词]视网膜  视神经  冰冻切片  厚度
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