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树突状细胞的培养及成熟的鉴定
李 望1
昆明市第一人民医院肝胆胰一科
摘要:
[摘要]目的 探讨人体外周血树突状细胞在体外培养诱导其成熟的方法,通过得到成熟的细胞培养技术,对树突状细胞功能的研究奠定实验基础.方法 通过Ficoll-Hypaque梯度离心法得到单个核细胞,再诱导使其分化、扩增、纯化形成稳定的树突状细胞,通过树突状细胞自身形态、特异性表型,抗原摄取能力,鉴别培养的细胞,从而得到具有典型特征的树突状细胞.结果 树突状细胞培养第7天,加入LPS后,倒置显微镜及扫描电镜下观察,树突状细胞成熟中,细胞胞质增大,细胞膜表面能形成大量树突状突起,表面标志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表达增高(P<0.05),共聚焦显微镜下,成熟的树突状细胞对抗原的吞噬能力减弱.结论 Ficoll-Hypaque梯度离心法能够得到稳定的树突状细胞体外培养体系.
关键词:  [关键词]Ficoll-Hypaque梯度离心法  树突状细胞  表型  抗原  吞噬
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