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熊果酸诱导甲状腺乳头状癌细胞TPC-1凋亡的实验
华 杰1),阮凌玉2),马定乾2),左晓霜2),向润清2),方山丹2),范 源2)1,2
1.(1)云南中医学院中药学院;2.2)临床医学院,云南 昆明 650500)
摘要:
[摘要]目的 研究熊果酸(ursolic acid UA)在体外对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1增殖的抑制作用.方法 采用不同浓度的UA干预细胞(对照组 0 μM,实验组3 μM、6 μM、12 μM);MTT法观察同一时间不同浓度的UA和不同时间同一浓度的UA对TPC-1细胞生长情况的影响;流式细胞术(FCM)检测应用 UA后TPC-1细胞凋亡情况及细胞周期分布情况;QRT-PCR检测UA干预后TPC-1细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-9 mRNA的表达情况;Western blot检测UA干预后TPC-1细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-9蛋白的表达情况.结果 MTT实验结果显示UA对TPC-1细胞增殖的抑制呈现出浓度和时间的依赖性,24 h、48 h、72 h的IC50分别为14.21 μM、10.56 μM、10.39 μM;流式Annexin V-FITC /PI 双染检测显示UA呈浓度依赖性诱导TPC-1细胞凋亡,且将TPC-1细胞的生长阻滞在S期;QRT-PCR实验发现,对照组与实验组均有 Bcl-2 、Bax、Caspase-9 mRNA的表达,UA 呈浓度依赖性下调Bcl-2 mRNA 的表达,上调Bax和Caspase-9 mRNA的表达;Western blot 结果显示,对照组与实验组均有Bcl-2、Bax、Caspase-9蛋白的表达,UA 呈浓度依赖性下调Bcl-2的表达,上调Bax和Caspase-9 的表达.结论 熊果酸可显著抑制人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖并诱导其凋亡,为甲状腺癌治疗提供一定思路.
关键词:  [关键词]甲状腺乳头状癌  熊果酸  凋亡  周期  Bcl-2  Bax  Caspase-9
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