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| ［摘要］目的 探讨DACH1 在肝癌中的生物学作用及其作用机制，为肝癌的早期诊断、治疗和预后评估提供帮助。方法 采用免疫组化方法检测 30 例肝癌组织和配对的正常组织样本中 DACH1 的表达水平。运用 Western Blot 方法检测DACH1，筛选出低表达DACH1 的肝癌细胞株。构建过表达DACH1的慢病毒转染HepG2细胞株，并通过Western Blot 方法验证DACH1表达改变的情况。采用CCK8检测高表达DACH1的HepG2细胞株在24、48、72、96 h增殖情况。采用流式细胞技术检测高表达DACH1的HepG2细胞株周期变化情况，并运用 Western Blot 方法检测周期相关蛋白CyclinD1、CDK4、CyclinE1、CDK2表达变化情况。高表达DACH1的HepG2细胞株建立裸鼠皮下移植瘤模型，观察体内增殖情况并用采用免疫组化验证肿瘤中DACH1的表达。结果 DACH1 在肝癌组织中的表达低于正常组织（P < 0.001）；DACH1 在肝癌细胞中的表达低于正常肝细胞株，HepG2、Hep3B、Huh7细胞系中HepG2的DACH1表达最低（P < 0.05）。高表达DACH1的HepG2细胞株增殖明显低于对照组（P < 0.05），表明DACH1具有抑制细胞生长的功能。高表达DACH1的细胞较对照组G0/G1期细胞增多，而S期细胞减少（P < 0.01）， G2/M期两者之间没有明显区别，并且周期相关蛋白CyclinD1、CDK4、CyclinE1、CDK2表达均降低（P < 0.05），表明DACH1能通过影响周期相关蛋白阻滞细胞周期进展。高表达DACH1的HepG2细胞株较对照组而言皮下肿瘤重量大约减轻了3倍，肿瘤形成后0、3、6、9天测量肿瘤体积可见高表达DACH1的HepG2细胞株肿瘤生长速度明显减慢（P < 0.05）。结论 DACH1 可以抑制肝癌细胞系HepG2的增殖和裸鼠皮下成瘤； DACH1 抑制肝癌细胞主要通过抑制周期相关蛋白从而阻滞细胞 G1/S 进展。 |
| 关键词: ［关键词］DACH1 肝癌 细胞周期 |
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