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| ［摘要］目的 建立L-蛋氨酸γ-裂解酶的原核表达、纯化体系．方法 合成Metase基因并构建重组质粒pBSK-Metase．通过分子克隆技术，构建重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase，并将重组子转化到感受态大肠杆菌Dh5α中．pGEX-4T-1-Metase经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导；pBV220-Metase经42℃温度诱导；并对诱导条件进行优化，获得大量表达；建立蛋氨酸裂解酶纯化体系．结果 构建出Metase基因的两种高效原核表达体系pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase，并优化各自的最佳诱导表达条件；建立重组蛋氨酸裂解酶的纯化体系．结论 成功建立重组蛋氨酸裂解酶的原核表达、纯化体系；获得高效原核表达重组子pGEX-4T-1-Metase，且获得纯度高达95%的蛋氨酸酶 |
| 关键词: ［关键词］重组 蛋氨酸裂解酶 表达 纯化 |
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