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成纤维细胞生长因子受体FGFR1真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞的表达
金锦花,李科岩,张 玲,王玉慧,邓晓明1
(中国医学科学院,北京协和医学院整形外科医院麻醉科,北京 100144)
摘要:
[摘要]目的 建立一个有效表达FGFR1的真核系统。方法 从人胎盘组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到FGFR1基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建成 pcDNA3.1-FGFR1质粒表达载体,并在HEK293T细胞重组表达;将pcDNA3.1-FGFR1质粒转染HEK293T细胞,通过免疫印迹和免疫荧光检测FGFR1在细胞中的表达情况。结果 扩增的FGFR1序列与数据库一致; 通过构建表达载体和转染细胞实现了FGFR1 cDNA在HEK293T细胞膜上的表达。结论 成功扩增出FGFR1 cDNA基因,经过转染 HEK293T细胞,实现了FGFR1在 HEK293T细胞的高效表达。
关键词:  [关键词]FGFR1  HEK293T细胞  表达  Western blot  免疫荧光
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