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| ［摘要］目的 探讨柚皮苷通过调控miR-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平；RT-qPCR检测miRNAs相对表达水平；双荧光素酶报告基因验证miR-199a-5p和ECE1靶向关系；MTT检测MC3T3-E1细胞增殖活力；碱性磷酸酶（ALP）检测MC3T3-E1细胞成骨分化能力；茜素红染色检测MC3T3-E1细胞矿化情况。结果 柚皮苷处理显著促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化指标Runx2、OPN、BMPs、OC等的表达、ALP活性以及细胞钙化能力水平（P＜0.01）。其中20 ng/mL浓度处理的效果最优。RT-qPCR检测结果显示，柚皮苷能显著上调miR-199a-5p的表达水平。双荧光素酶报告基因检测结果表明ECE1是miR-199a-5p的一个靶基因；并且，miR-199a-5p靶向下调ECE1的表达。进一步实验表明，敲降miR-199a-5p显著降低柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化的促进作用（P＜0.01）；敲降ECE1显著促进了柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和生物矿化能力的促进作用（P＜0.01）；柚皮苷处理加同时敲降miR-199a-5p和ECE1组MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化能力与柚皮苷组无显著差异（P＞0.05）。对细胞成骨分化标志的检测也证明了上述结果。由此可知，柚皮苷通过上调miR-199a-5p对ECE1靶向下调作用，进而促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化和矿化能力。结论 柚皮苷处理显著促进了MC3T3-E1细胞的成骨分化水平；这种作用是通过上调miR-199a-5p/ECE1分子轴实现的。 |
| 关键词: ［关键词］骨损伤修复 柚皮苷 miR-199a-5p ECE1 成骨分化 |
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